日期:[2024年07月15日]
-- 智慧生活报 --
版次:[A14]
体外受精－胚胎移植术中，精卵如何在体外完成受精？
既然精子、卵子在体内无法“见面”，我们为何不能将精子、卵子都取出来，在体外让他们“见面”受精（此即体外受精），成功后，再送回子宫让其着床发育，实现怀孕。这就是试管婴儿的基本思路。那为什么会有人选择进行试管婴儿，它的原理又是什么呢？精卵在体外又是如何完成受精的？
(1)体外受精－胚胎移植的原理
妇女每个月只有一个卵子发育长大，要取到这一个卵子是非常不容易的。为解决这个问题，现在几乎所有的试管婴儿中心都是首先应用药物，使妇女每个月有7、8个或十几个甚至数十个卵泡同时发育长大。卵泡的发育情况可以非常方便地用阴道B超观察。当卵泡成熟后，在阴道B超监视及指导下，通过一根细针（直径不到2mm，）经阴道穿刺抽吸卵泡，卵子即存在于卵泡液中，在显微镜下将卵子找到后，放入专门的卵子培养液中。
丈夫通过手淫方法将精子射入一个无菌的杯子中，通过洗涤，将活动最好的精子挑选出来，再将挑选出的精子和卵子放在一起（即放在同一个试管内，现多用平皿，此即试管婴儿所以得名），精子依靠自己的运动，钻入卵子中，实现受精。在显微镜下观察受精情况，将成功受精并分裂的受精卵（受精卵一旦开始分裂，即称为胚胎）用一根非常细的软管送回患者的子宫内（此即移植）。这就完成了试管婴儿的全过程。
但是在受精过程中，只有一个能直接进入到卵子中完成受精，对于那些精子数量及运动能力严重低下的男性患者，要想通过正常方式使妻子怀孕是渺茫的：一是没有精子能运动到受精部位，即使有精子到达了受精部位来到了卵子身边，但它的运动能力太弱了，自己钻不到卵子中去，怎么办呢？现代科学技术的发展，已能很好地解决这一问题：我们将卵子取出来，放在显微镜（放大200-400倍）下，用一根直径只有0.005毫米的针将精子吸进去，然后将针穿入到卵子中，再把精子放出来，这就是卵胞浆内单精子显微注射（英文缩写ICSI)。
(2)体外受精－胚胎移植技术的周期步骤
取卵与取精：在女方取卵日，同时安排男方体外取精。根据《世界卫生组织人类精液检查处理实验室手册》（第五版）中规定精液量正常应该大于1.5ml，精子浓度≥15×106/ml，总精子数＞39×106，前向运动精子比例≥32%，正常精子形态的百分比≥4%。胚胎学家通过医学方法，比如密度梯度离心法、上游法等对取出的精液进行优化，获取较好的精子与卵子完成受精。卵子的质量作为形成优质胚胎的关键因素，医生通过阴道超声引导，用一根很细的取卵针经阴道穹隆侧壁直接穿刺卵巢上的卵泡，在负压吸引下将每一个卵泡内的卵泡液吸出，护士通过传递窗及时将其递交给培养室的工作人员，同培养液一起倒入培养皿内，在显微镜下识别并快速找出卵子。
体外受精
（1）体外受精16～18h进行原核的观察，若是正常受精则形成2PN。而0PN、1PN及多PN均为异常受精。对于0PN、1PN发育而来的胚胎在无2PN来源胚胎情况下可视为备选胚胎（必要时行PGD进行二倍体胚胎筛选），而多PN发育而来的胚胎则直接废弃。（2）体外受精43～45h进行4细胞观察。胚胎在适宜的培养环境下，按照标准的细胞分裂过程进行细胞分裂。但是不同发育潜能的胚胎存在差异，同一时期不同胚胎发育能力不同，或快或慢，甚至有些胚胎出现发育停滞等现象。通过对不同时期胚胎的观察，挑选各个时段均正常分裂的胚胎作为可利用胚胎进行移植。（3）体外受精67～69h进行8细胞观察，此时对于形成的卵裂期胚胎是重要的一天。有优质胚胎（卵裂球数目适当，大小均一，没有或者少碎片）被选择移植到女方子宫内等待着床受孕，随后等待卵裂期胚胎形成桑葚胚，这一天不必进行观察。（4）体外受精106h～108h，此时间按正常发育进程，将会形成囊胚，但并非所有的卵裂期胚胎都能形成可利用的囊胚。（5）对体外受精106h~108h发育迟缓的部分囊胚再次进行观察。若形成可利用囊胚，可选择移植或者冷冻，而发育异常即废弃。
吴志华 山西省汾阳医院
(1)体外受精－胚胎移植的原理
妇女每个月只有一个卵子发育长大，要取到这一个卵子是非常不容易的。为解决这个问题，现在几乎所有的试管婴儿中心都是首先应用药物，使妇女每个月有7、8个或十几个甚至数十个卵泡同时发育长大。卵泡的发育情况可以非常方便地用阴道B超观察。当卵泡成熟后，在阴道B超监视及指导下，通过一根细针（直径不到2mm，）经阴道穿刺抽吸卵泡，卵子即存在于卵泡液中，在显微镜下将卵子找到后，放入专门的卵子培养液中。
丈夫通过手淫方法将精子射入一个无菌的杯子中，通过洗涤，将活动最好的精子挑选出来，再将挑选出的精子和卵子放在一起（即放在同一个试管内，现多用平皿，此即试管婴儿所以得名），精子依靠自己的运动，钻入卵子中，实现受精。在显微镜下观察受精情况，将成功受精并分裂的受精卵（受精卵一旦开始分裂，即称为胚胎）用一根非常细的软管送回患者的子宫内（此即移植）。这就完成了试管婴儿的全过程。
但是在受精过程中，只有一个能直接进入到卵子中完成受精，对于那些精子数量及运动能力严重低下的男性患者，要想通过正常方式使妻子怀孕是渺茫的：一是没有精子能运动到受精部位，即使有精子到达了受精部位来到了卵子身边，但它的运动能力太弱了，自己钻不到卵子中去，怎么办呢？现代科学技术的发展，已能很好地解决这一问题：我们将卵子取出来，放在显微镜（放大200-400倍）下，用一根直径只有0.005毫米的针将精子吸进去，然后将针穿入到卵子中，再把精子放出来，这就是卵胞浆内单精子显微注射（英文缩写ICSI)。
(2)体外受精－胚胎移植技术的周期步骤
取卵与取精：在女方取卵日，同时安排男方体外取精。根据《世界卫生组织人类精液检查处理实验室手册》（第五版）中规定精液量正常应该大于1.5ml，精子浓度≥15×106/ml，总精子数＞39×106，前向运动精子比例≥32%，正常精子形态的百分比≥4%。胚胎学家通过医学方法，比如密度梯度离心法、上游法等对取出的精液进行优化，获取较好的精子与卵子完成受精。卵子的质量作为形成优质胚胎的关键因素，医生通过阴道超声引导，用一根很细的取卵针经阴道穹隆侧壁直接穿刺卵巢上的卵泡，在负压吸引下将每一个卵泡内的卵泡液吸出，护士通过传递窗及时将其递交给培养室的工作人员，同培养液一起倒入培养皿内，在显微镜下识别并快速找出卵子。
体外受精
（1）体外受精16～18h进行原核的观察，若是正常受精则形成2PN。而0PN、1PN及多PN均为异常受精。对于0PN、1PN发育而来的胚胎在无2PN来源胚胎情况下可视为备选胚胎（必要时行PGD进行二倍体胚胎筛选），而多PN发育而来的胚胎则直接废弃。（2）体外受精43～45h进行4细胞观察。胚胎在适宜的培养环境下，按照标准的细胞分裂过程进行细胞分裂。但是不同发育潜能的胚胎存在差异，同一时期不同胚胎发育能力不同，或快或慢，甚至有些胚胎出现发育停滞等现象。通过对不同时期胚胎的观察，挑选各个时段均正常分裂的胚胎作为可利用胚胎进行移植。（3）体外受精67～69h进行8细胞观察，此时对于形成的卵裂期胚胎是重要的一天。有优质胚胎（卵裂球数目适当，大小均一，没有或者少碎片）被选择移植到女方子宫内等待着床受孕，随后等待卵裂期胚胎形成桑葚胚，这一天不必进行观察。（4）体外受精106h～108h，此时间按正常发育进程，将会形成囊胚，但并非所有的卵裂期胚胎都能形成可利用的囊胚。（5）对体外受精106h~108h发育迟缓的部分囊胚再次进行观察。若形成可利用囊胚，可选择移植或者冷冻，而发育异常即废弃。
吴志华 山西省汾阳医院
